在常見實驗呢中,有很多不當操作情況下都會影響抗原—抗體反響的,以elisa試劑盒為例,為您解析這些要素別離來自哪里:
抗原—抗體結合進程可分為兩個階段:一階段為特異性結合階段,此階段反響迅速,在數(shù)秒鐘至數(shù)分鐘內完成,但無可見反響;第二階段為可見反響階段,歷時數(shù)分鐘至數(shù)小時,此階段易受以下要素的影響。
一、電解質
抗原和抗體別離有對應的極性基團,能彼此吸附并由親水性變?yōu)槭杷?。電解質的存在可使抗原—抗體復合物失掉電荷而凝聚,呈現(xiàn)可見反響。故免疫學實驗中多采用生理鹽水稀釋抗原或抗體。
二、酸堿度
抗原—抗體反響zui適pH值規(guī)模是6—8。超出此規(guī)??捎绊懣乖?、抗體的理化性狀,呈現(xiàn)假陽性或假陰性。
三、溫度
適當?shù)臏囟瓤稍黾涌乖c抗體分子磕碰的時機,加快二者結合的速度??贵w抗原反響的zui適溫度為37℃。
此外,適當振蕩或拌和也可促進抗原—抗體分子的接觸,提高結合速度。
根據(jù)抗原的性質、結合反響的現(xiàn)象、參加反響的成分要素,可將抗原—抗體反響分為凝集反響、沉淀反響、補體參加的反響、采用符號物的抗原—抗體反響等。近年來隨著免疫化學、細胞生物學和分子生物學的開展,以及各種現(xiàn)代高新技能在免疫學中的使用,使免疫學技能建立了許多微量、快速、特異、靈敏并能進行自動化檢測和數(shù)據(jù)分析處理的新方法。
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