PBS是磷酸緩沖鹽溶液一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。它是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液,主要成分為Na ?HPO ? 、KH?PO ? 、NaCl和KCl。PBS緩沖液不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。 由于Na?HPO ? 和KH?PO ? 它們有二級(jí)解離,緩沖的pH值范圍很廣;而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補(bǔ)加1 mmol/L CaCl?和0.5 mmol/L MgCl?,以提供雙價(jià)陽(yáng)離子。
磷酸緩沖鹽溶液作用:
1、因?yàn)镻BS緩沖液具有可調(diào)整的適宜pH緩沖作用和鹽平衡的作用。不使用蒸餾水的原因在于水會(huì)破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)和生物特性。不使用生理鹽水的原因在于它不能夠調(diào)整PH值。所以,對(duì)生物細(xì)胞進(jìn)行清洗是PBS緩沖液。
2、PBS緩沖液的PH值是細(xì)胞的PH值范圍,而且在酸堿微量的刺激下,PH值一般也沒有任何的變化。培養(yǎng)基的PH值時(shí)很容易變化的,對(duì)于細(xì)胞具有極大的損傷,但是PBS緩沖液可以保持細(xì)胞能在適合的PH值范圍之內(nèi)健康的生活活。
PBS溶液配置方法:
采用去離子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步驟進(jìn)行:
1、配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;
2、配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;
3、 將18.2%(體積分?jǐn)?shù))KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合;
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