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液體培養(yǎng)基的配置與分類
  • 發(fā)布日期:2022-07-29      瀏覽次數(shù):1408
    •       液體培養(yǎng)基( liquid culture medium),固體培養(yǎng)基的對應(yīng)詞,是微生物或動植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。它具有進(jìn)行通氣培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)。在靜止的條件下,在菌體或培養(yǎng)細(xì)胞的周圍,形成透過養(yǎng)分的壁障,養(yǎng)分的攝入受到阻礙。由于在通氣或在振蕩的條件下,可消除這種阻礙以及增加供氧量,所以有利于細(xì)胞生長,提高生產(chǎn)量。

      培養(yǎng)基的配置

      1.配料

      配方換算→在容器中加入少量水〔蒸餾水,自然水〕→按照配方稱取各種藥品〔依次加入〕→加足所需水量《一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋》。

      2.溶解

      淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀

      加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃ ,且需要邊

      加熱邊攪拌以防止燒焦。

      3.調(diào)PH

      用1N的鹽酸或的1N NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。

      4.過濾

      濾紙或棉花進(jìn)行過濾。

      5.分裝

      一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

      (1)三角瓶

      若作靜置培養(yǎng),則100 ml培養(yǎng)基/250 ml的三角瓶,最多不能超過150 ml培養(yǎng)基/250 ml的

      三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15~20 ml培養(yǎng)基/250

      ml的三角瓶,保證通氣良好。

      (2)試管分裝

      液體培養(yǎng)基一般裝4~5 ml,約試管的1/4高度;

      固體斜面培養(yǎng)基一般裝3~4 ml,約試管的1/5高度。

      6.包扎

      分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。

      7.滅菌

      按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養(yǎng)成分會被破壞,培養(yǎng)

      基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。

      8.擺斜面

      滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長度的1/2。

      9.貯存

      培養(yǎng)基在30℃下放置一天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用

      指一類利用動、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基等。

      化學(xué)分類

      天然培養(yǎng)基

      指的是一類動、植物或微生物包括其提取物制成的培養(yǎng)基。如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基等。

      組合培養(yǎng)基

      又稱為合成培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基,是一類按微生物的營養(yǎng)要求精確設(shè)計(jì)后用多種高純化學(xué)試劑配制成的培養(yǎng)基。如葡萄糖銨鹽培養(yǎng)基、淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基等。

      半組合培養(yǎng)基

      指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。