瓊脂糖凝膠是以瓊脂糖為支持介質(zhì)制備的凝膠。瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經(jīng)化學(xué)修飾后熔點降低的低熔點瓊脂 糖,瓊脂糖的熔點在62?65°C之間,融化后在37°C下可維持液態(tài)數(shù)小時,30°C時凝固成膠。多用于對染色體DNA在凝膠內(nèi)進行原位酶切及DNA片段回收。瓊脂糖凝膠 由于孔徑大常用于大分子蛋白質(zhì)、DNA的分離。
基本結(jié)構(gòu)
瓊脂糖凝膠是依靠糖鏈之間的次級鏈如氫鍵來維持網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的疏密依靠瓊脂糖的濃度。一般情況下,它的結(jié)構(gòu)是穩(wěn)定的,可以在許多條件下使用(如水,pH4-9范圍內(nèi)的鹽溶液)。瓊脂糖凝膠在40℃以上開始融化,也不能高壓消毒,可用化學(xué)滅菌活處理。
瓊脂糖 Agarose,縮寫為AG,是瓊脂中不帶電荷的中性組成成份,也譯為瓊膠素或瓊膠糖。瓊脂糖化學(xué)結(jié)構(gòu)由β-D-吡喃半乳糖(1-4)連接3,6-脫水α-L-吡喃半乳糖基單位構(gòu)成.
制作方法
把瓊脂糖,即幾乎不含硫酸根的主要成分為多糖的瓊脂,溶于熱水,冷卻制成的凝膠。
作用
制成的小顆粒用于凝膠過濾。適于用sephadex不能分級分離的大分子的凝膠過濾,若使用5%以下濃度的凝膠,也能夠分級分離細胞顆粒、病毒等。利用其吸附性小的特點,有時用它代替瓊脂、以作為免疫電泳或凝膠內(nèi)沉降反應(yīng)的支持物。
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