1、 葡萄糖:用于細(xì)胞能量代謝。
2、CO?:細(xì)胞需要少量的二氧化碳來維持生長。
在培養(yǎng)基中,溶解的CO?與碳酸氫鹽離子處于平衡狀態(tài),許多培養(yǎng)基利用了這種CO?/碳酸氫鹽反應(yīng)來緩沖培養(yǎng)基的pH值。CO?溶解在培養(yǎng)基中,與水反應(yīng)生成碳酸。隨著細(xì)胞代謝產(chǎn)生更多的CO?,隨著下面的化學(xué)反應(yīng)向右驅(qū)動,介質(zhì)的pH值下降,通過向培養(yǎng)基中添加碳酸氫鈉,可使pH值維持在7.2 ~ 7.4的最佳范圍。
3、酚紅:用于監(jiān)測培養(yǎng)基的pH值。
在細(xì)胞生長過程中,由于細(xì)胞釋放的代謝物改變了pH值,培養(yǎng)基的顏色也隨之改變。在較低的pH值下,酚紅會變成中黃色,而在較高的pH值下,它會變成中紫色。對于大多數(shù)培養(yǎng)體系(pH為7.2 ~ 7.4),培養(yǎng)基應(yīng)為鮮紅色。(部分特殊培養(yǎng)基不添加酚紅,例如對雌激素敏感的乳腺組織細(xì)胞,酚紅會發(fā)揮跟類固醇相似的功能從而影響細(xì)胞。)
4、L-谷氨酰胺:
幾乎是所有哺乳動物和昆蟲細(xì)胞所必需的氨基酸,用于合成蛋白質(zhì),參與核酸代謝。它相比其他氨基酸更不穩(wěn)定,容易降解,降解的速率和程度與儲存溫度、時間和pH值有關(guān)。
5、非必需氨基酸NEAA:
所有的培養(yǎng)基配方都含有10種必需氨基酸以及半胱氨酸、谷氨酰胺和酪氨酸。在一些培養(yǎng)基中還需要加入其他非必需氨基酸(丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、脯氨酸和絲氨酸)可以減少細(xì)胞的代謝負(fù)擔(dān),從而增加細(xì)胞增殖。
6、 丙酮酸鈉:
丙酮酸是糖酵解過程中的中間有機(jī)酸代謝物,可以輕易地進(jìn)出細(xì)胞,可以為合成代謝過程提供能量來源和碳骨架。大多數(shù)培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的最終濃度為1mM,但在L-15培養(yǎng)基中增加到5mM,方便在無CO2環(huán)境中使用。
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