1)除鹽透析時(shí)將高鹽的樣本加入透析袋中,夾緊,用你選擇的保存液進(jìn)行透析,一般在2-8度透析過(guò)夜,中間要更換一到兩次透析液,另外透析液體積盡量大些。
先把透析液放進(jìn)容器中(容器的直徑小于透析袋長(zhǎng)度),再將夾好的透析袋豎直放進(jìn)去,這樣透析袋與透析液的接觸面積是最大的,幾乎整個(gè)透析袋都與透析液接觸,溶液的置換面積最大,置換速度最快。
如果夾子很穩(wěn),那就夾好,先把透析液放進(jìn)容器中(容器的直徑小于透析袋長(zhǎng)度),再將夾好的透析袋豎直放進(jìn)去,這樣透析袋與透析液的接觸面積是最大的,幾乎整個(gè)透析袋都與透析液接觸,溶液的置換面積最大,置換速度最快。
假如夾子夾不穩(wěn),那就盡量避免有夾子的一端接觸透析液,以免漏出去。
把透析液放進(jìn)容器中(容器的直徑小于透析袋長(zhǎng)度),再將夾好的透析袋平放進(jìn)去,這樣透析袋與透析液的接觸面積不大,大約只有一半的透析袋與透析液接觸,置換速度最慢。
假如夾子不是特別不穩(wěn),那就將透析袋兩端回折,夾子夾在回折的中間,這樣可以減小漏液的危險(xiǎn),再讓透析袋放在容器液面上,夾子向上(容器的直徑小于透析袋長(zhǎng)度)。
要注意定時(shí)打濕整個(gè)透析袋,不然接觸不到透析液的透析袋可能會(huì)干裂漏液凈,然后4度保存,要保濕不能干掉。
要是干了或者生長(zhǎng)微生物,就丟棄,免得影響實(shí)驗(yàn)效果。
透析的時(shí)間不確定,但是勤攪拌(例如磁力攪拌)和勤換洗脫液會(huì)加快達(dá)到目的的速度。
2)蛋白質(zhì)吸附量,小于1ug/克,(以透析袋干重計(jì))。
正常使用PH值5-9(可重復(fù)使用)。極限使用PH值2-12(一次性使用)。
3)前處理:煮沸5分鐘后用蒸餾水60℃洗沖2分鐘,置4℃蒸餾水中待用。
長(zhǎng)期保存液:0。05%-0。1%疊氮鈉,1mMEDTA或50%甘油,溫度(4℃),使用前以蒸餾水洗凈。
透析袋一定不能裝滿,因?yàn)橥肝鲆旱臐B透壓低于透析袋內(nèi)樣品,樣品中的鹽出去的時(shí)候透析液也會(huì)進(jìn)來(lái),造成樣品的體積增大,嚴(yán)重的時(shí)候可能會(huì)脹破透析袋,在夾子不穩(wěn)時(shí)會(huì)很容易漏液。
除了第一次使用,透析袋還是干的,要預(yù)處理之外,第二次就不用預(yù)處理了。
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